最终诊断

    
    【明天终于能迎来久违的休息了，争取全部改完，并且争取加更
    ps：这周真不是人过的】
    此外，B细胞似乎在不同的癌症和亚型中分布不均，而这些癌症和亚型是整个癌症免疫系统的重要组成部分。例如，B细胞在食管鳞状细胞癌()和中的浸润程度低于结肠癌(COAD)和皮肤黑色素瘤(SKCM)。一项头颈部鳞状细胞癌()免疫景观研究显示，HPV+富含更多的GCB细胞，而被更少的B细胞浸润，包含更多的pc或切换的MBCs，这可能是由于缺少CD4+Tfh细胞。然而，在一项关于非小细胞肺癌的研究中，相邻区域的B细胞富集量大于肿瘤区域，这可能与炎性细胞浸润有关。除了横向尺寸外，tilb的组成在肿瘤的纵向进展过程中也会发生变化，促进或抑制肿瘤的发展。早期CRC肿瘤中的B细胞最可能是表达肿瘤抑制因子的pre-B样细胞，而在晚期CRC肿瘤中，它们往往是pc。与原发性结直肠癌相比，肝转移灶中B细胞明显减少，可见免疫抑制?ve-like在晚期NSCLC中B细胞减少，PCs增加，提示预后不良。在肝硬化患者中观察到体液免疫基因(如IGHG1)的表达增加，这表明在肿瘤形成前体液免疫的代偿性增加。因此，当体液免疫基因表达突然降低时，可能存在发生肿瘤的风险。
    到目前为止，许多癌症的单细胞免疫谱已经被绘制出来，如黑色素瘤、乳腺癌、肺癌和大肠癌，但它们主要集中在T细胞或MDSCs。泛癌的单细胞研究关注的是T细胞的异质性和功能，而不是B细胞，因为它们在TME中的数量较高。然而，B细胞作为适应性免疫的重要组成部分，由于其所占比例小，往往被忽视，这也是肿瘤免疫谱中缺失部分的原因。此外，不同分子亚型B细胞的差异性以及肿瘤发展过程中的动态变化，使得研究者需要对B细胞进行横向和纵向的研究，这在目前的研究中也是缺乏的。特别是在免疫治疗的研究中，需要从多个时间点采集样本，动态监测B细胞，观察治疗反应。
    肿瘤中的B细胞亚群
    通常，根据分化过程，B细胞可分为幼稚B细胞、MBCs和ASCs，它们在TME中各有不同的表型和功能(表2)。在绘制癌症免疫细胞图谱时，由于特定癌症中B细胞的比例较低，通常将其分为CD19+CD20+B细胞和CD138+SDC1+PC。针对TIL-B的scRNA-seq分析将这些细胞的尺寸降低到更高的分辨率，导致了更不同的B细胞群体。MBC通常分为交换式MBC(IGD-)和非交换式MBCS(IGD+)。此外，ASCs还可分为PC(CD138+)和浆母细胞(PBS)(CD138-)。依靠scRNA-seq平台，某些亚群还可以通过其高表达的特定基因来确定，而不是传统的B细胞分类。例如，滤泡B细胞(CD19+CD20+)，GCB细胞(LRMP+CD38+)，活化B细胞(CD71+CD10-Ki67+)和干扰素诱导的B细胞(IFITM1+IFI44L+)。综上所述，不同肿瘤中B细胞亚群的客观多样性和单细胞分析的主观个体化方法共同导致了TIL-B亚群定义的多样性。因此，对符合研究目的的B细胞进行适当而准确的定义，对研究人员提出了更高的生物学知识水平。
    三级淋巴结构
    TLS是位于肿瘤核心或边缘区域的淋巴细胞聚集，主要包括具有FDC的GC和具有成熟DC的T细胞区。TIL-B被APC和TFH细胞诱导分化，介导抗肿瘤功能，实现原位肿瘤破坏(图3)。由于TLS在抗原呈递、激活B细胞、增加细胞因子信号和促进肿瘤相关抗体释放方面的重要性，TLS对免疫反应的作用非常显著。在几项研究中，TLS已被证明与黑色素瘤患者、肺癌患者和乳腺癌患者的生存率呈正相关。有趣的是，肿瘤附近发炎区域的TLSS可能会促进某些癌症的转移和复发。TLS的定位方法主要依赖于Hamp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;amp;E和IHC，包括TLS相关标记物CD19CD20、CD3、DC-MP、CXCL13和-seq为检测TLS的抗肿瘤功能提供了更深层次的洞察力，突出了功能性B细胞亚群及其与其他细胞的合作在结构中产生和维持记忆和效应性抗肿瘤反应的关键作用。
    Helmink等人对黑色素瘤新辅助ICB试验队列中的1760个B细胞进行分类，得出结论：TLS的存在与ICB的反应密切相关，可能是总体存活率较高的标志。与无应答者相比，应答者从基线开始有更丰富的B细胞浸润，这具有预测意义。此外，与无应答者相比，应答者的克隆计数和BCR多样性增加。值得注意的是，另一项黑色素瘤队列研究发现，TLS中的T细胞主要是CD4+T细胞，而不是CD8+T细胞，CD8+T细胞经历了抗原呈递并表达了生存分子bcl-2。因此，TLS结合CD8+T细胞的存在可能是预测这些患者的免疫反应和总存活率的最好标记物。
    此外，Petitprez等人建立了基于TME的肉瘤免疫分类，发现E级(即免疫群体尤其是B系的高表达)患者对ICB的反应最好，存活率也最高。一个普遍的现象是，TLS丰富的肿瘤有更多的CD8+T细胞浸润。一个可能的解释是B细胞指导CD8+T细胞识别肿瘤新抗原。这些CD8+T细胞可以被预耗尽和PD-1+，这使得ICB在这些富含TLS的肿瘤中发挥作用。总之，TLS是ABC和CD8+T细胞产生抗肿瘤免疫的地方，它可以将免疫抑制的肿瘤转化为免疫原性的肿瘤，从而为ICBS创造了最大限度发挥抗肿瘤作用的机会。因此，通过靶向肿瘤血管的光等细胞因子结合免疫治疗来诱导TLS可能会延长患者的生存期。
    记忆B细胞
    根据MBCs与Tfh细胞相互作用过程中是否发生CSR，将MBCs分为非交换MBCs(IgD+)和交换MBCs(IgD-)。在一些自身免疫性疾病中检测到双阴性MBs(CD27-IgD-)最近在NSCLC中发现，并与切换的MBCs数量呈负相关，可能是耗竭B细胞亚型。值得注意的是，在人类TNBC组织中，IGH谱系分析显示CD27-非典型MBs具有最高的簇内多样性，提示更多的SHMs。也有报道称，双阴性TIL-B的数量与Treg细胞表型(FoxP3+CD4+TILs)和低生存率有关。到目前为止，关于CD27-IgD-B细胞在TME中的分化和生成过程及其功能尚不清楚。
    非交换MBC也被称为早期储存或GCB细胞，它们没有经历CSR，有潜力分化为传统MBs或长寿PCs。在GC中，非开关MBs向Tfh细胞提供MHCII肽并促进其成熟。Lu等人在人乳腺癌组织中发现了新辅助化疗后出现的+CD20+CD27+IgD+B细胞亚群。利用B细胞特异性缺失小鼠，发现B细胞中的通过诱导T细胞活化增强抗肿瘤免疫能力。同样，在NSCLC样本中观察到TIL-Bs(CD19+CD20+CD27+CD21+)的抗原呈递功能，它们的数量与效应T细胞应答相关[88]。作为体液免疫的候选细胞，转换单核细胞具有强大的抗肿瘤功能，因为它们能够通过抗原特异性记忆分化为分泌抗体的pc。在一个黑色素瘤队列中，应答者的肿瘤显示出明显更高的MBCs浸润，而非应答者的B细胞主要是na?veB细胞，这突出了MBCs在诱导ICB应答中的作用。Wiend等人从HPV+患者中分离出三组B细胞，并将其中一组ABCs定义为CD19+CD20+IgDCD71+CD10。在TME、PBMC、转移淋巴结中可见大量ABC浸润，提示ABC介导持久抗原特异性体液免疫。在原发性CRC患者中，术前化疗后，一种免疫共刺激和MHC分子上调的活化免疫激活型B细胞取代了先前活化程度较低的B细胞。PDAC患者在疾病进展的早期有浸润的开关型MBCs显示了长期生存。值得注意的是，在TME中对MBCs的探索主要集中在它们的两种主要功能，抗原呈递和抗原特异性记忆，这两种功能允许体液免疫和细胞免疫的结合。然而，大多数研究集中在MBCs组，而不是更详细的分类，这忽略了亚组之间的不同功能。
    抗体分泌细胞
    ASC可分为PBS和细胞致力于分化为PC，下调CD23表达和IL-4信号，并发展为Pre-Pbs以适应其新的分泌功能。PBS指的是GC后B细胞和具有增殖和产生抗体能力的成熟PC之间的短暂分化。然而，有证据表明，在GC-T区的早期阶段也产生了PBS，并在GC的选择过程中介导了反馈调节。经过SHM和CSR后，对肿瘤相关抗原具有高亲和力的GCB细胞最终分化为成熟的PC，产生IgG、IgA、IgM和IgE，提供特定的功能。到目前为止，GCs如何调节PBS和PC的输出的机制仍然不清楚。
    在人类黑色素瘤队列中，Griss等人发现了CD20和CD19降低的亚群，并上调了CD38，CD38被定义为表达CD27，CD38和PAX5基因的类似PB的群体。ScRNA-seq分析显示，这一亚群与抗PD-1治疗有更好的反应和更长的总生存期。在HPV+患者中，在TME中观察到HPV特异性ASCs，提示存在原位和抗原特异性应答。然而，ASCs与肿瘤细胞之间的关系并不简单，这在很大程度上取决于它们分泌的免疫球蛋白以及免疫球蛋白与各种肿瘤细胞类型之间的相互作用。
    肿瘤相关抗体主要为IgA和IgG。通常，在各种癌症中，肿瘤内IgA的高表达与结直肠癌和膀胱癌等癌症患者的生存率较低有关。一个可能的解释是，IgA与Breg细胞的表型有关，Breg细胞促进Treg细胞的形成，而Treg细胞又通过释放转化生长因子-β(TGF-β)促进IgA+B细胞的转换。然而，最新证据证实IgA在卵巢癌中具有抗肿瘤作用，它与卵巢癌细胞表面普遍表达的聚合IgA受体(PIgR)结合。免疫球蛋白可修复髓样细胞对抗细胞外致癌因子，并使恶性肿瘤细胞对CD8+T细胞的细胞杀伤敏感。因此，以IgA和IgA分泌细胞为靶点的免疫治疗可能是治疗pIgR+粘膜肿瘤的有效途径。
    IgG通过其在、CDC、ADCP中的多种功能以及APC促进抗原表达而与抗肿瘤B细胞活性密切相关。然而，最近的研究发现，TME中高IgG与生存不良有关，与更具侵袭性的病理特征有关，与CD8+T细胞低浸润有关。在乳腺癌中，原发肿瘤教育的B细胞可以聚集在肿瘤引流淋巴结中，并分泌致病的IgG，以糖基化的膜蛋白HSPA4为靶点促进淋巴结转移。然而，这一争议可能是由于不同的IgG亚型所致。在肺腺癌中，IgG1和IgG4的比例与非沉默突变负荷呈正相关，这突出了抗原提呈和直接杀伤肿瘤细胞的作用。此外，IgG1高浸润与黑色素瘤患者和KRAS突变肺腺癌患者存活率较高有关。相反，RNA测序数据表明IgG3促进黑色素瘤的发展，这可能是因为IgG3介导的体液反应是短暂的和早期的，SHM率和亲和力都很低。另一种可能的解释是，单体IgG3与表达于巨噬细胞和自然杀伤细胞上的FcγR有很高的亲和力， 这与其他亚型不同。因此，非特异性IgG3与这些细胞上空置的Fcγ受体结合，从而停止它们与肿瘤细胞表面结合的肿瘤特异性细胞毒抗体的相互作用。IgG4还削弱了IgG1介导的抗肿瘤免疫，并促进了黑色素瘤的炎症。然而，使用肿瘤特异性抗体比使用非特异性自身抗体更能保证患者的生存，而且促进TME中IgG产生的细胞因子或趋化因子可能会抑制T细胞的分化或细胞毒功能。因此，抗体的抗肿瘤或促肿瘤作用不仅取决于其生物学特性，还取决于TME中各种细胞和细胞因子的相互作用，更注重从单细胞角度探索TME的复杂网络。
    B和T细胞
    B细胞和T细胞作为最好的合作伙伴，共同作用，相互调节和分化，这表现为大量B细胞和T细胞共渗到TLS结构中(图3)。没有成熟B细胞的Jh小鼠CD4+和CD8+T细胞减少，Treg细胞表型增加。在卵巢癌的单细胞分析中，T细胞浸润越多的样本，TME中浸润的明显B细胞簇越丰富。CRC和TNBC的单细胞分析也证实了滤泡B细胞和T细胞之间的相互作用。在乳腺癌和卵巢癌中也获得了类似的结果，这表明TIL-B可能与T细胞一起在抗肿瘤免疫中发挥作用。然而，许多scRNA-seq研究仅仅关注这一现象，但其相互关系的原理还需要在体内和体外进一步评估。