重振中医

    
    刘良朋并没有停下。
    他继续说道：
    “还有，我们依据刚刚所说的刚发吗，进行了成分特有性分析。
    发现三棱中含有较多的阿魏酸蔗糖酯和甘油酯的衍生物，此外还有自然界少见的异香豆素类成分。
    在三棱众多活性成分中可体现出一定的专属性，加之这些特征性成分分别具有抗凝、抗炎和抗肿瘤活性，可作为三棱Q-marker筛选的重要参考指标。”
    这个发现，虽然不能够说是开创性的，但是也的确是有奠基的作用的。
    在没有发现之前，人们对三棱全部集中在使用上面。
    而现在，人们可以把更多的精神用在探索上面。
    “人们可以把更多的精神用在探索上面。
    比如说，成分可测性分析。
    最近，有关三棱成分分析的研究正处于蓬勃发展的阶段，我们利用比色法测总黄酮、总皂苷、总酚和总多糖的含量，采用滴定法测定甘露醇的含量。
    当然，我们也可以采用对照药材探索薄层色谱条件的优化，采用高效液相色谱法和紫外分光光度法分别测定游离阿魏酸和总黄酮含量，采用气质联用法分析三棱挥发油和脂肪酸类成分，利用HPLC进行三棱指纹图谱研究等。
    目前，已采用HPLC法进行含量测定的三棱指标性成分有很多。
    包括p-香豆酸、阿魏酸、对羟基苯甲酸、香兰素、对羟基苯甲醛、香草酸、芦丁、山柰酚、芒柄花素、5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、异阿魏酸、环-酪氨酸-亮氨酸、环-苯丙氨酸-苯丙氨酸。
    这些成分除5-羟甲基糠醛外均具有苯环结构，紫外检测波长通常为254~320nm。
    但是嘛，现有研究尚且还存在很多的问题。
    首先，我们从现在业内了解，也从大家的含量测定结果来看，以上指标性成分在三棱中的含量总体偏低，除p-香豆酸、阿魏酸、对羟基苯甲酸、5-羟甲基糠醛外，其余成分在绝大多数药材中的含量低于百分之0.01。
    所以，我们建议对含量较低活性成分的检测采用灵敏度更高方法比如液质联用法。
    第二点，缺乏对三棱中特征性成分，比如苯丙酸蔗糖酯、甘油酯类成分以及生物碱的定量分析研究。
    第三点，对于三棱挥发性成分主要集中于MS定性检测，需加强对其主要成分定量分析方面的研究。”
    刘良朋想了想之后，继续说道。
    “在很多方面，中药配伍环境分析临床上三棱与莪术两者常相须合用。”
    “采用网络药理学方法分析三棱-莪术相须配伍的功效物质发现，三棱中的芒柄花素、β-谷甾醇、豆甾醇为活性成分。
    钟院长在建立了同时测定三棱-莪术药对中p-香豆酸、阿魏酸含量的HPLC法，且当三棱-莪术质量比为2∶1时，p-香豆酸、阿魏酸含量最高。
    我们用石油醚提取药对莪术三棱和两单味药的脂溶性成分，经甲酯衍生化处理后进行GC-MS分析，发现药对脂溶性成分与单味药存在明显差异。
    除了在三棱与药对中共存的亚油酸甲酯、棕榈酸甲酯外，三棱中其余的主要脂肪酸成分，比如如油酸甲酯在药对中未检测到，而且药对中共有23个新脂溶性成分产生，包括β-榄烯酮等。
    说明三棱与莪术配伍后并不是成分和药效的简单相加，需要深入探讨与配伍前后药效变化相关的活性成分，为三棱Q-marker提供有益的参考。”
    “另外，还有一种情况。”
    “不同加工炮制方法分析加工炮制直接影响着药材的成分及药效。”
    “三棱的历代加工炮制方法包括去皮须、去毛、去芦、切片、捣碎、火炮、纸煨、炒炭、醋炙、醋煮、米煮、酒煮、酒炒、乌头炒、干漆炒、面裹煨等，现代临床上三棱一般经净制、切制或醋炙后入药。”
    “当然，我们与麸炒比较，醋炒三棱对家兔血小板体外聚集抑制率最高。”
    “钟院长采用比色法测定不同炮制品中黄酮的含量，结果醋炒三棱的含量最高，比生品增加约40%。麸炒三棱的含量最低，比生品减少约50%。
    而另外医生采用紫外分光光度法测定了三棱不同炮制品中总皂苷的含量，发现减压冷浸后切制和醋炒样品中总皂苷的含量与清蒸、麸炒相比更高。
    最后，我们采用GC-MS法分析发现，三棱经醋炙、醋蒸后的挥发油含量较生品均有不同程度下降，具体成分种类也有所差异，产生了2个新组分即1，7，7-三甲基-[2，2，1]-2-庚醇乙酸酯和亚油酸乙酯。
    由此可见，炮制前后含量变化较大的是黄酮类、皂苷类和挥发油类成分，因此可考虑为Q-marker的候选。”
    “还有，可入血化学成分分析。
    我们采用HPLC法建立了同时测定灌胃三棱后大鼠血清中对羟基苯甲酸、香草酸、阿魏酸和芦丁含量的方法，认为该检测方法能够同时、快速、准确测定三棱4种有效成分在血清中的含量。
    对羟基苯甲酸、香草酸、阿魏酸和芦丁即是三棱药材中原有的主要成分。
    当然，这也是血中移行成分，口服药物通常要经过胃肠吸收入血再经血液循环到达相应组织器官后方可发挥药效。
    故而能在血液中检测的对羟基苯甲酸、香草酸、阿魏酸和芦结语：三棱中含有苯丙素类、黄酮类、有机酸类、环二肽类、甾体类、生物碱类及挥发油等多种类型的活性成分。
    具有抗血小板聚集、抗血栓、抗凝、抗炎、抗肿瘤、镇痛以及抗氧化等作用。目前，有关三棱的研究文献中已报道作为含量测定指标的成分。
    其中，包括部分苯丙素类比如p-香豆酸、阿魏酸、异阿魏酸。
    黄酮类比如如芦丁、山柰酚、芒柄花素。
    有机酸类比如如对羟基苯甲酸、香兰素、对羟基苯甲醛、香草酸、原儿茶酸。
    环二肽类[如环-比如酪氨酸-亮氨酸和环-比如苯丙氨酸-苯丙氨酸。”
    刘良朋最后说道：“从有效性、可测性、配伍、传递与溯源比如加工与炮制、入血分析，苯丙素类、黄酮类、有机酸类成分为三棱Q-marker的必定之选。
    从特有性来看，阿魏酸、芦丁和香草酸的专属性不强，比如阿魏酸、芦丁分别在药材当归、槐米中亦有较高的含量。
    然而，在三棱中首次发现的阿魏酸蔗糖酯和甘油酯类、异香豆素类以及生物碱类成分尚无相关定量分析，故后续有待着重对三棱上述特征性成分进行定量分析及药理作用研究。
    由于三棱木化程度较高，所含成分含量通常较低[2]，应注意结合其各种活性成分的性质特点，优选可靠且灵敏高的分析方法，从而建立药物使用者对十三味解郁胶囊的信任。”